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化妝品中甲醛含量的高效液相(HPLC)檢測方案

甲醛已經被世界衛生組織確定為致癌和致畸形物質,是公認的變態反應源,也是潛在的強致突變物之一。甲醛對人體健康的影響危害極大,化妝品直接作用于皮膚,其甲醛的含量大小對人體的健康至為關鍵。

本方法中柱后衍生-高效液相色譜法測定化妝品中游離甲醛含量,適用于水劑、膏霜乳液、凝膠類化妝品。


以下為化妝品中游離甲醛含量的測定方法


1

實驗原理


樣品中的游離甲醛經高效液相色譜分離,柱后衍生,在420nm波長下檢測,根據保留時間定性,峰面積定量,以標準曲線法計算含量。取0.2g樣品時,本方法對游離甲醛的檢出濃度為0.003%,最低定量濃度為0.005%。


2

試劑和材料


所用試劑均為分析純或以上規格,水為GB/T 6682規定的一級水(另有規定除外)。

甲醛標準物質水溶液,使用前進行標定。

磷酸,分析純。

乙酸銨,色譜純。

冰乙酸, 分析純。

乙酰丙酮,分析純。

二氯甲烷,分析純。

磷酸溶液:取磷酸2mL,緩緩加入到998mL水中,混勻。

柱后衍生溶液:稱取62.5g乙酸銨,加7.5mL冰乙酸,5mL乙酰丙酮,加水至1000mL,搖勻。該溶液可有效使用3天。

甲醛系列標準溶液:精密量取甲醛標準物質水溶液適量,用磷酸溶液稀釋成1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL的標準系列溶液。臨用現配。


3

儀器和設備


  • LC-10T高效液相色譜儀

  • 柱后衍生儀。

  • 天平。

  • 離心機。

  • 渦旋振蕩器。


4

樣品處理


稱取樣品0.2g(精確至0.001g)于10mL具塞比色管中,加磷酸溶液至刻度,渦旋處理1分鐘,5000rpm離心5min,取上清液經0.45μm微孔濾膜(水相)過濾,濾液作為待測溶液,并盡快測定。

必要時,可以取上清液加入10mL二氯甲烷,振搖,靜置分層后取上層溶液經0.45μm微孔濾膜(水相)過濾,濾液作為待測溶液。


5

色譜條件


色譜柱:C18色譜柱(250 × 4.6mm× 5μm);

流動相:磷酸溶液;

流速:1.0mL/min;

柱溫:20℃;

檢測波長:420nm;

進樣體積:10μL;

柱后衍生溶液流速:0.5mL/min;

衍生溫度:100℃。


6

色譜測定


在色譜條件下,取甲醛系列標準溶液分別進樣,進行液相色譜分析,以系列標準溶液濃度為橫坐標,甲醛衍生物的峰面積為縱坐標,進行線性回歸,建立標準曲線,得到回歸方程。

取處理得到的待測溶液進樣10μL,進行色譜分析,根據保留時間和光譜圖定性,測得甲醛衍生物的峰面積,根據標準曲線得到待測溶液中游離甲醛的質量濃度。計算樣品中游離甲醛的含量。



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